RKO人結腸癌細胞(低分化)

縮寫:RKO

種屬:Human/人

來源:ATCC

縮寫:RKO

種屬:Human/人

來源:ATCC

背景資料:RKO是一個低分化的結腸癌細胞系。RKO細胞含有野生型P53，但缺乏人甲狀腺受體核受體(h-TRbeta1)。RKO細胞的P53蛋白的水平高于RKO-E6細胞。RKO細胞系是RKO-E6和RKO-AS45-1的親本細胞系。該細胞系在裸鼠中成瘤，且在軟瓊脂中形成集落。

生長特性:貼壁生長

培養條件:89%EMEM+10%FBS+1%雙抗

規格:T25

細胞數:1x10^6 cells

細胞活力:.95

細胞檢測:不含細菌、真菌、支原體污染。

傳代方法:1:2—1:4

凍存條件:90%FBS+10%DMSO

懸浮細胞接收后的操作流程與注意事項
1.如簽收時出現培養瓶壁破裂，漏液等情況請及時做好照片記錄并聯系實驗室 
2.擰松瓶蓋，細胞瓶豎立培養8h（或過夜）
3.待細胞沉底后吸除上層液體（含碎片殘渣，請小心操作），然后吸取沉底的細胞層（2ML左右轉移到新的培養瓶，加入新鮮的*培養基（如細胞狀態較差可將血清濃度調高到15%）繼續培養
 
懸浮細胞常規培養傳代流程（請嚴格遵照無菌操作）
1.將培養瓶/皿中的細胞重懸混勻
2.吸取2/3或者一半混勻后的細胞懸液到新的培養瓶/皿
3.分別在原瓶/皿和新分瓶的培養瓶/皿加入等量或者2倍的新鮮培養基，使細胞密度保持在5 X10(5) /ml左右
4.注意培養基PH值變化情況和細胞密度，定期半量換液（每周2-3次），待細胞密度大于2 X 10(6) /ml以后重復1項操作或者凍存

RKO人結腸癌細胞(低分化)

貼壁細胞接收后的操作流程與注意事項
1.收到細胞當天盡快更換新鮮*培養基，第二天再進行消化處理
2.如果細胞收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態，請將懸浮的細胞即時離心，加15%血清的*培養基到新的培養皿/瓶繼續培養觀察。同時原培養瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的*培養基，培養觀察
3.若出現生長不均：貼壁細胞若出現分布不均，成島狀生長，可將細胞進行消化，重懸打散細胞，加入新鮮培養基進行培養

貼壁細胞常規培養傳代流程（請嚴格遵照無菌操作）
1.吸出原培養瓶中的培養基，PBS緩沖液潤洗細胞兩次，加適量0.25%胰酶進行消化細胞（注意把握消化時間）
2.鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁松動時（不建議消化到細胞漂浮）去掉胰酶，加6~8ml *培養基，輕輕吹打細胞層，盡量把細胞層吹落，吹散
3.取部分細胞懸液轉移到新的培養皿/瓶中，添加適當的*培養基，把細胞懸液打勻，于培養箱中培養
4.注意培養基PH值變化情況，定期換液（每周2-3次），待細胞密度達到80%以后重復1項作或者凍存